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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)配制培養(yǎng)基過程中應(yīng)該注意什么問題
更新時(shí)間:2017-08-31   點(diǎn)擊次數(shù):1327次

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)配置培養(yǎng)基需要:

1、根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。
2、注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度及合適配比,保持合適滲透壓 。
3、將培養(yǎng)基的 pH 控制在適宜的范圍之內(nèi),以利于不同類型微生物的生長繁殖或代謝產(chǎn)物的積累。
4、要注意各種原料的配比,每種培養(yǎng)基的配比合適的配比,可以按照老師的要求去做。
5、如需要加熱的時(shí)候注意時(shí)間的把握。

 

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)配置培養(yǎng)基步驟:
(一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。 
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補(bǔ)充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。 
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。 
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。 

 

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基的滅菌:
常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),殺菌效果好。

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