ELISA試劑盒嚴格按照實驗步驟進行ELISA實驗,得出試驗數(shù)據(jù),就需要處理計算數(shù)據(jù),做出擬合曲線,計算濃度了??梢越栌脤I(yè)制作曲線軟件進行分析,如curve expert 1.3,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,ELISA試劑盒計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
這里就介紹一下運用ELISA試劑盒EXCEL進行計算的方法,你只要雙擊圖表,把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中,就可以擬和曲線。根據(jù)曲線方程式,計算出濃度。
方法:
1、擬和曲線:
輸入*行: 濃度值, 如0 10 50 100 400
輸入第二行:該濃度下的調(diào)整后的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42
選擇這些輸入的數(shù)據(jù),用插入里的圖表按鈕,進入圖表向?qū)?,?ldquo;標(biāo)準(zhǔn)類型”中選擇“xy散點圖”;在“子圖表類型”中選擇“折線散點圖”,按“下一步”;選擇“系列產(chǎn)生在行”,按“下一步”;數(shù)據(jù)標(biāo)志,可以填寫:如數(shù)據(jù)y軸,OD值;數(shù)據(jù)x軸,濃度;按下一步,點擊完成。可得曲線圖。
單擊曲線,按右鍵,選擇“添加趨勢線”,ELISA試劑盒在類型中,選擇多項式;在選項中,選擇顯示公式,選擇顯示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面說的方法: 雙擊圖表,把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中,就可以擬和曲線。
2、計算濃度:
*次實驗:
標(biāo)準(zhǔn)曲線為:
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
為例,ELISA試劑盒已知OD值,計算濃度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x,可以得到:
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0
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